طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv) با استفاده از وکتور egfp-n۱
نویسندگان
چکیده
سابقه و هدف: در این پروژه، هدف کلی تحقیق طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv-1) با استفاده از وکتور pegfp-n1 بود. کلونینگ ژن vpr قبلاً درون وکتور pegfp_n1 صورت نگرفته بود. مواد و روش ها: وکتور puc19 دارای ژن تمام طول vpr جهت تایید با استفاده از آنزیم های محدود کننده برش داده شد. سپس جهت اضافه کردن سایت های برش آنزیمی (xhoi, kpni) در ژن مورد نظر مطابق با سایت های موجود در وکتور pegfp-n1 با طراحی پرایمر واکنش pcr بر روی ژن vpr با استفاده از پلاسمید نوترکیب puc19-vpr به عنوان الگو انجام گرفت. محصول پس از الکتروفورز، مورد استخراج از ژل قرار گرفته و تخلیص گردید. سپس هر دو محصول pcr و وکتور pegfp-n1 تحت واکنش هضم آنزیمی قرار گرفتند. در مرحله بعد، واکنش الحاق توسط آنزیم t4 انجام گرفت و این ژن به درون وکتور pegfp-n1 کلون شده و به درون باکتری dh5a ترنسفورم گردید. در نهایت سازه استخراج شده و با هضم آنزیمی و pcr مورد تایید قرار گرفت. یافته ها: در این پروژه ابتدا ژنvpr درون وکتور puc19 پس از برش آنزیمی مورد تایید قرار گرفت. سپس این ژن به طور تمام طول و با قرار دادن توالی های برش از 2 آنزیم محدودالاثر در طراحی پرایمرهای اختصاصی در واکنش pcr تکثیر داده شد و اندازه محصول در الکتروفورز مورد تایید قرار گرفت. محصول واکنش الحاق ژن vpr به طور تمام طول در وکتور pegfp-n1 نیز هم در هضم آنزیمی و هم در pcr مورد تایید قرار گرفت. استنتاج: ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی با استفاده از وکتور pegfp-n1 با موفقیت انجام گرفت.
منابع مشابه
طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1
Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
زمینه و هدف: هاری (rabies) یک آنسفالیت حاد است که سالانه سبب مرگ بیش از 60.000 انسان در جهان می شود. تنها راه نجات بیماران استفاده ی به موقع از واکسن های کارآمد است. هدف از این مطالعه معرفی یک سیستم بیانی یوکاریوتی جدید به منظور بیان ژن نوکلئوپروتیین (n) ویروس هاری می باشد. این سیستم جهت ارزیابی و ساخت واکسن ضد هاری به کار می رود. روش بررسی: توالی کامل ژن n سویه pv ویروس هاری به روش reverse tra...
متن کاملساخت بکمیدهای نوترکیب واجد ژن هماگلوتینین ویروس آنفلوانزای انسانی
هدف: ویروس آنفلوانزای a (h1n1) از مهم‌ترین زیرگونههای ویروس آنفولانزاست که منجر به پیامدهای متعددی در جهان شده است. هماگلوتینین یکی از مهم‌ترین آنتیژنهای این ویروس میباشد که باعث ایجاد پاسخ ایمنی میشود. اتصال این پروتئین به گیرندههای سلول میزبان منجر به شروع فرایند بیماری‌زایی میشود. با توجه به نقش حیاتی مرحله اتصال ویروسی، این پژوهش درصدد استخراج و جایسازی ژن هماگلوتینین و زیرواحد بزرگ...
متن کاملطراحی و بیان پروتئین نوترکیب از ژن tcpA ویبریوکلرا در وکتور pET32a(+)
ززمینه و هدف: ویﺒﺮیﻮﮐﻠﺮا یﮏ ﺑﺎﮐﺘﺮی ﭘﺎﺗﻮژن ﮔﺮم ﻣﻨﻔﯽ اﺳﺖ ﮐﻪ ﻋﺎﻣﻞ ﺑﯿﻤﺎری اﺳﻬﺎل اﺳﺖ. یکی از مهم‌ترین عوامل بیماری‌زایی باکتری ویبریوکلرا است؛ پیلی هم تنظیم شونده با توکسین است که برای کلونیزاسیون باکتری در روده لازم است. هدف از این تحقیق بررسی بیوانفورماتیکی و بیان پروتئین نوترکیب TcpA بود. روش بررسی: ژن tcpA به لحاظ وجود کدون های نادر بررسی و بهینه‌سازی ژن با استفاده از نرم‌افزارهای بیوانفورماتیکی...
متن کاملطراحی و ساخت وکتور نوترکیب merB به منظور پاکسازی زیستی جیوه آلی
متیل جیوه یکی از فرم های پایدار جیوه آلی است که می تواند وارد زنجیره غذایی موجودات زنده گردد و خطرات زیست محیطی جبران ناپذیری را برای اکوسیستم طبیعی بوجود آورد. پایداری جیوه و هزینه زیاد روش های مرسوم پالایش عوامل نگران کننده ای هستند. در این رابطه، روش های بیولوژیکی مانند استفاده از بیوراکتورهای مبتنی بر باکتری ها یا آنزیم های آنها بعنوان یکی از روش های میکروب پالایی راه حلی پایدار، کم ه...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانجلد ۲۶، شماره ۱۳۷، صفحات ۲۳-۳۱
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023